货号：	Abt-101
供应商：	北京爱必信生物技术有限公司
英文名：	Homocysteine (HCY)
保质期：	试剂在2 - 8℃密封避光保存，可稳定一年
保存条件：	2 - 8℃密封避光保存
规格：	R1：R2=4：1

                                       同型半胱氨酸检测试剂盒(酶法)说明书
                                               Homocysteine (HCY)
 
产品名称：同型半胱氨酸检测试剂盒(酶法)
英文名称：Homocysteine (HCY)
包装规格：R1:43ml R2:10ml
预期用途
用于检测人血液中的同型半胱氨酸。
同型半胱氨酸（Hcy）为含巯基氨基酸，是体内甲硫氨酸循环过程中的一个代谢中间产物。血液中总Hcy浓度的病理性升高会导致高同型半胱氨酸血症。近年来的研究已确认，高同型半胱氨酸血症与作为人类第一杀手的动脉粥样硬化、高血压、心肌梗死等多种心血管疾病的发生有密切关系，是心血管疾病的一个新的独立和重要的危险因素。目前国内外已经把Hcy作为心血管疾病的一个检测指标。
 
检测原理 
循环酶反应使信号放大。
Hcy被转化为游离型后，通过与共价底物反应，循环放大，同时产生腺苷。腺苷立即水解成氨和次黄嘌呤，氨在谷氨酸脱氢酶的作用下，使NADH转化为NAD , 样本中的Hcy浓度与NADH转化速率成正比。
HCY + SAM  SAH + Met
 
 
SAH   HCY + Ado Inosine + NH3
NH3 +NADH +2-Oxoglutarate Glutamate + NAD+ +H2O
 
储存条件及有效期 

• 试剂在2 - 8℃密封避光保存，可稳定一年。
• 已经开启的试剂注意避免污染。

样品要求 

• 新鲜血清或肝素抗凝血浆，请采血后立即离心分离血浆。
• 血清、血浆可在室温稳定4天，2-8ºC稳定几周，-20ºC稳定数月或几年。
• 注意：不可使用含有氟化钠的血清或血浆。
• 溶血，混浊，严重血脂样本不适宜做Hcy检测。
• 采血前，请尽量避免高蛋白饮食，高蛋白饮食可能导致Hcy升高。
• 血清样本检测结果常比抗凝血浆检测结果高5-10％。

检验方法 （速率法）
1.  试剂配制：液体试剂开启即可使用。
2.  试验条件：
主波长 340 nm   副波长 700 nm
标本量 13 μl     
R1  240 μl    R2  65μl  
 
                            测定
  
   37℃
0           5      7.5    10（分）
3.  定标曲线
    试剂盒中提供的两个校准品两点定标。如果需要多点定标，请用生化仪
上的Spline函数曲线拟合而不是直线拟合。
4.  校准程序
试剂盒内配有专用标准，校准品溯源至HPLC。
5. 质控控制程序
选用与校准品对应的质控品，质控测定值应在规定的范围内。如果结果偏离范围，请按以下步骤查找原因：
4.1． 检查参数设置和光源是否正确。 
4.2． 检查比色杯和吸样针是否洁净。
4.3． 检查水是否被污染，细菌增长会导致不正确的结果。
4.4． 检查反应温度。
4.5． 检查试剂盒的效期。
6.结果计算 
            　样本吸光度
样本浓度 =                   　´ 标准浓度
标准吸光度
 
参考范围
根据文献资料，Hcy正常参考范围与年龄相关(血浆)：

年 龄	HCY浓度
成人	≤15 µmol/l
老年人（≥60岁）	15-20 µmol/l
百岁以上	25-27 µmol/l

 
建议各实验室根据年龄、性别、饮食、地域的不同建立自己的正常参考范围。
检验方法的局限性和抗干扰性
以12.9umol/L的Hcy为基础的血清，加入不同浓度干扰物，偏差<10％的：
血氨 50umol/L
NaPi 1mmol/L
NaF 1mmol/L
甘油三酯 2500mg/dL
抗坏血酸 10mmol/L
胆红素 20mg/dL
血红蛋白 1200mg/dL
谷胱甘肽 0.5mmol/L
L－半胱氨酸 1 mmol/L
S-腺苷甲硫氨酸SAM 20umol/L
腺苷 100 umol/L
胱硫醚 20 umol/L
产品性能指标
1. 准确性
准确性偏差应不超过±10%。
2.重复性
测定值的变异系数 CV％≤10%。
根据NCCLS EP-5文件进行Hcy精密度检测：

批内	水平1（7µmol/l）	水平2（12µmol/l）	水平3（29.5µmol/l）
次数	20	20	20
CV	4.5％	1.87％	2.4%

 

批间	水平1（7µmol/l）	水平2（12µmol/l）	水平3（29.5µmol/l）
次数	20	20	20
CV	5.87％	4.88％	2.57%

3.线性范围
本法线性范围达50 umol/l，如果超出线性范围，请以0.9%的生理盐水稀释再做，结果乘以稀释倍数。
4.灵敏度
本试剂盒的检测灵敏度为1.5umol/L。
注意事项

• 红细胞中的Hcy 释放到血浆会使Hcy结果升高， 因此要注意及时分离血浆。
• 虽然S-腺苷同型半胱氨酸(SAH)会引起严重的正干扰。 但正常人体血浆中含SAH量极低，不会造成干扰。
• 使用下列药物治疗的病人，会引起HCY检测水平偏高：氨甲蝶呤，卡马西平，苯妥英钠，一氧化二氮，6-氮尿嘧啶苷。
• 红细胞中的3-偶氮腺苷抑制反应体系中的酶，从而抑制Hcy的生成。本产品不能使用含有3-偶氮腺苷的样本。
• 避免混用不同批号的试剂。
• 本试剂上机参数见附页。

 
生产企业
企业名称：北京爱必信生物技术有限公司
生产地址：北京亦庄经济开发区科创6街88号3号楼
邮    编：101111
电    话：010-56315110
传    真：010-56315107
网    址：www.abxbio.com.